MC38小鼠結腸癌細胞/種屬鑒定

MC38小鼠結腸癌細胞/種屬鑒定

細胞特性
1） 來源：結腸癌
2） 形態：上皮細胞樣
3） 含量：>1x106 個(ge) /mL
4） 汙染：支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存：使用含有優(you) 質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞後，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min後，於(yu) 潔淨操作台棄去上清，加入推薦使用的培養(yang) 基後轉移至10cm培養(yang) 皿或者T75培養(yang) 瓶中培養(yang) ，傳(chuan) 代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體(ti) 操作見細胞培養(yang) 步驟。

小鼠結腸癌細胞MC38用途：僅(jin) 供科研使用。
                     
細胞培養(yang) 步驟
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yang) 基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，80%；優(you) 質胎牛血清，20%。
2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yang) 基，10%DMSO，現用現配。液氮儲(chu) 存。
MC38小鼠結腸癌細胞/種屬鑒定

細胞處理：
1） 複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並檢查細胞密度。
2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
對於(yu) 貼壁細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後加入少量yi酶，細胞變圓脫落後，加入約1ml含血清的培養(yang) 基後加入凍存管中，再添加10%DMSO後進行凍存。

18新利苹果客户端密码主要產(chan) 品和服務介紹：

       一、原代細胞服務：
              各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
              多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
              原代細胞分離和培養(yang) 相關(guan) 試劑、kit、培養(yang) 基添加劑等
              原代細胞相關(guan) 技術服務及整體(ti) 實驗外包服務

       二、細胞係服務：
              細胞株/係培養(yang) 、增殖、凍存和相關(guan) 說明書(shu)
              細胞係培養(yang) 過程的技術指導
              細胞係培養(yang) 基、添加劑、血清及相關(guan) 生長因子、試劑等

       三、iPS細胞服務：
              iPS細胞基礎培養(yang) （有滋養(yang) 層or無滋養(yang) 層）
              iPS細胞增殖及冷凍保存
              iPS基礎培養(yang) 技術實習(xi)
              新藥及實驗儀(yi) 器上市前評估

       四、其他技術外包服務、客戶定製服務等

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