B95-8 EBV 轉化的絨猴白細胞

B95-8 EBV 轉化的絨猴白細胞介紹

B95-8細胞株源自暴露於(yu) 人白血球中抽提的EB病毒的絨猴白血球。B95-8是一個(ge) 連續株並釋放高滴度的轉染EB病毒。此細胞株提供EB病毒用於(yu) 建立人的連續淋巴細胞株。

細胞特性

1） 來源：外周血淋巴細胞

2） 形態：淋巴母細胞樣，懸浮生長

3） 含量：>1x106 個(ge) /mL

4） 汙染：支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性

5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式：

（1）幹冰運輸，收到後立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接複蘇；

（2）存活細胞，收到後應繼續生長，傳(chuan) 代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體(ti) 操作見細胞培養(yang) 步驟。

（3）收到細胞後請拍照，3天內(nei) 如果發現汙染，請及時拍照與(yu) 我們(men) 聯係。

細胞用途：僅(jin) 供科研使用。

B95-8 EBV 轉化的絨猴白細胞接收後的處理：

1） 收到細胞後，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們(men) 。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，酒精消毒瓶壁並將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 約2-3h。

3） T25瓶中的培養(yang) 基取出離心後，去上清，添加6ml新的*培養(yang) 基，重新加入原T25培養(yang) 瓶。

4） 如果細胞長滿90%請及時進行細胞傳(chuan) 代，傳(chuan) 代培養(yang) 用本公司附帶的*培養(yang) 基。

細胞培養(yang) 步驟

一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640培養(yang) 基；北美胎牛血清，10%；雙抗1%。

2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yang) 基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入T25培養(yang) 瓶中培養(yang) ，補加培養(yang) 基至6ml。

2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

1.  收到細胞後*傳(chuan) 代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

下麵T25瓶為(wei) 類；

1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數板計數。

2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為(wei) 10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取

沒有相關產品信息...